Lectura: ~2 min · Parte de la certificación gratuita en ciencia de péptidos
La liofilización (secado por congelación) es la razón por la que un péptido puede viajar a temperatura ambiente y durar años. Entender el proceso explica qué contiene en realidad un vial.
Congelación
La solución se congela por completo. El péptido queda atrapado entre los cristales de hielo, en una matriz amorfa (sólida pero sin orden de cristal).
Secado primario
Al vacío, el hielo se sublima: pasa directo de sólido a vapor sin derretirse, como el hielo seco. Aquí se va la mayor parte del agua.
Secado secundario
Con un poco más de temperatura se retira el agua que seguía pegada a la torta, hasta dejar muy poca.
El resultado es una torta seca y porosa que se disuelve rápido. Sin agua, la desamidación, la isomerización y la hidrólisis prácticamente se detienen.
Para qué sirve cada componente
| Componente | Función |
|---|---|
| Manitol, sacarosa, trehalosa | Agentes de carga y crio/lioprotectores: dan cuerpo a la torta y protegen al péptido al congelar y secar |
| Tampones (acetato, fosfato, histidina) | Mantienen el pH en el rango donde el péptido es más estable |
| Conservadores (alcohol bencílico, m-cresol) | Frenan el crecimiento de microbios en envases de varias dosis; el alcohol bencílico al 0.9 % es el del agua bacteriostática |
| Tensioactivos (polisorbato) | Reducen la agregación en las interfaces (como las burbujas) |
| Contraión (acetato, TFA) | Forma parte de la sal del péptido; no es activo |
El pH de la solución reconstituida
Cada péptido tiene un rango de pH en el que es más estable. Además, se disuelve peor cerca de su punto isoeléctrico. Por eso algunos compuestos se reconstituyen mejor en un medio un poco ácido (ácido acético diluido) que en agua bacteriostática. No es gusto: es química.
Un vial liofilizado es estable. Una solución reconstituida empieza a degradarse desde el primer minuto. Reconstituye cerca del momento de uso y refrigera la solución de inmediato.
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