Lectura: ~2 min · Parte de la certificación gratuita en ciencia de péptidos
Un péptido puede perder actividad sin que se rompa ningún enlace químico (covalente). Basta con que cambie su estado físico.
Agregación
Agregarse es pegarse unas moléculas con otras. Lo hacen por sus zonas hidrofóbicas, las partes que "huyen" del agua. Los agregados pueden ser pequeños e invisibles, o crecer hasta formar partículas y turbidez (aspecto nublado).
Algunos péptidos forman fibras amiloides, unas fibras muy ordenadas. El ejemplo clásico es la amilina humana nativa. La agregación:
- Reduce la cantidad de péptido activo disponible.
- Puede aumentar la inmunogenicidad (la capacidad de provocar una respuesta del sistema inmune), porque el cuerpo reconoce más fácil los agregados como extraños.
- Se favorece con concentraciones altas, pH cercano al punto isoeléctrico (el pH en el que la molécula queda sin carga eléctrica neta), agitación y ciclos de congelar y descongelar.
Estrés mecánico e interfaces
Agitar un vial crea burbujas. Cada burbuja es una frontera aire-líquido (interfaz). Ahí el péptido se desdobla en parte y se pega a otros. Por eso la indicación de siempre, girar suavemente y no agitar, tiene una razón física precisa.
Adsorción a superficies
Adsorción es quedarse pegado a una superficie. Cuando la concentración es baja, una parte notable del péptido puede quedar adherida al vidrio o al plástico del vial y de la jeringa. Es un problema real en diluciones muy grandes. Por eso no conviene preparar soluciones demasiado diluidas.
Ciclos de congelación y descongelación
Al congelar, el agua forma cristales de hielo. El péptido queda apretado en los canalitos de líquido que quedan entre los cristales, junto con sales y tampón. Esa «crioconcentración» y los cambios de pH que trae favorecen la agregación.
Cada ciclo suma daño. Por eso se recomienda dividir en alícuotas (porciones pequeñas) y no volver a congelar lo que ya se descongeló.
Turbidez, partículas, películas o un cambio de color indican degradación física o química. Una solución correcta es transparente. Si tienes dudas, no se usa.
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